Діагностика ВІЛ: методи дослідження, терміни виконання аналізів

Інфекція «вірус імунодефіциту людини — ВІЛ, являє собою вірусне захворювання. Воно поступово руйнує певні лейкоцити і може викликати синдром набутого імунодефіциту — Сніду.

Вірус імунодефіциту людини (ВІЛ) – відноситься до типу ретровірусів.

Що таке ретровірус?

Являє собою геномний ДНК і зберігає генетичну інформацію не тільки як ДНК (більшість інших організмів використовує тільки ДНК), але і як РНК (рибонуклеїнова кислота).

На сьогодні прийнято розділяти такі шляхи інфікування ВІЛ:

  • статевий контакт без використання засобів захисту
  • перинатальний шлях зараження (спостерігається у дітей)
  • в ході гемотрансфузії (переливання крові)
  • при використанні заражених шприців (частіше у ін’єкційних наркозалежних хворих)

Коли ВІЛ проникає у клітини людини, він вивільняє рибонуклеиновую кислоту і повторює (копіює) ДНК із РНК ВІЛ за допомогою ферменту, званого зворотного транскриптазой.

Утворилася ДНК включається в ДНК інфікованих клітин. Цей процес є зворотним, так як задіяні людські клітини для реплікації РНК і ДНК.

Інші віруси (інфекції) РНК, такі як поліовірус, вірус грипу, вірус кору, на відміну від ретровірусу не виробляють реплікації ДНК після проникнення в клітину. Ці віруси виробляють репліки рибонуклеїнової кислоти вихідної РНК.

У ВІЛ-інфікованих клітинах кожен раз, коли відбувається поділ клітин, ДНК інтегрованого ВІЛ також реплікується в додаток до власної ДНК клітини.

Реплікація ДНК ВІЛ знаходиться в одному з наступних станів:

  • Неактивний (приховане) стан: вірус існує, але не надає згубної дії на організм людини
  • Стан активації: вірус домінує над функцією інфікованих клітин, він виробляє велику кількість нових реплікацій ВІЛ, які вражають інші клітини організму, провокуючи стан стійкого набутого імунодефіциту

Важливим аспектом терапевтичного впливу залишається точна і своєчасна діагностика захворювання.

Перші лабораторні дослідження ВІЛ – патології проводилися більше тридцяти п’яти років тому.

Сучасна діагностика включає використання імунологічних, гематологічних і молекулярних методів виявлення вірусного патогена. Використовуються тест-системи минулого століття мали досить обмежені можливості і визначали ретровірус першого типу.

Їх технічні можливості не виходили за рамки визначення імуноглобуліну G.

По мірі розвитку лабораторної діагностики та удосконалення методик дослідження з’явилася можливість виявлення обох типів вірусу. Поява систем тестування третього покоління значно розширило діагностичні можливості.

Тепер виявлення вірусу 1-2 типу можливо вже через кілька тижнів після інфікування. Така сучасна діагностика дозволяє швидко призначити антиретровірусне лікування.

В десятки разів скорочує ризик розвитку більш тяжкої стадії вірусу СНІД. До останніх винаходів можна віднести системи тестування 4 покоління. Вони є комбінованими методами дослідження.

Система використовується для виявлення антитіл до ВІЛ обох типів і одночасного виявлення антигену р24 (білка стінки ефіру нуклеозидів ретровірусу). Такі можливості тест-систем 4 покоління скорочують час «серологічного вікна» мінімум на тиждень. (Це період наявності в організмі ВІЛ ще без появи антитіл).

Лабораторна діагностика ВІЛ

Проведення лабораторних аналізів є основним аспектом діагностування ВІЛ-захворювання та призначення адекватної терапії. Крім того, діагностика є моніторингом якості лікування та стану здоров’я пацієнта.

Читайте також:  ВІЛ у чоловіків: симптоми, ознаки, фото і стадії Сніду

Регулярне проведення лабораторних аналізів дає можливість:

  • контролювати перебіг інфекційного процесу
  • коригувати схему терапії
  • проводити моніторинг побічних реакцій від прийому медикаментозних засобів

Стандартний аналіз на ВІЛ передбачає дослідження крові пацієнта.

Основний біологічний матеріал — венозна кров, забір якої проводиться вранці, до прийому їжі. Попередньою, особливої підготовки від пацієнта не потрібно.

Основною підготовкою є виключення прийому алкоголю за кілька днів. При можливості припинення прийому антибіотиків та противірусних засобів за 5-7 днів до аналізу.

Клініко-імунологічна експертиза може проводитися у державній поліклініці. Але в такому випадку потрібно направлення від лікаря-терапевта або сімейного лікаря.

Сьогодні все частіше практикується діагностика ВІЛ, Сніду та ЗПСШ в незалежних лабораторних центрах, де є можливість здати аналіз анонімно.

У ході діагностики пацієнту надається особливий номер, відомий тільки йому і персоналу установи. Проте в даному випадку є певний мінус.

Результати тестування не можуть бути передані в клініку для подальшої госпіталізації хворого. Не надаються гінеколога/венеролога/ інфекціоніста, не можуть бути занесені до реєстру інфекційних патологій (ОРУИБ).

Клініка захворювання: як себе проявляє ретровірус

Основний спосіб передачі ВІЛ-захворювання:

  • статевий контакт
  • від матері до дитини (трансплацентарно, через родовий шлях, грудне молоко)
  • у ході процедури переливання крові, трансплантації органу
  • при введенні внутрішньовенних наркотиків нестерильним шприцом

Іншими словами, до тих пір, поки немає контакту з кров’ю або рідинами організму, ймовірність інфікування ВІЛ у повсякденному житті майже дорівнює нулю.

Кількість вірусу, що міститься в секреторної рідини, такої як слина або сльози, дуже мало. Навіть якщо вірус знаходиться в даних виділеннях, то досі не повідомлялося про зараження при використанні загальної ванни або рушники.

ВІЛ є досить «крихким» вірусом, який інактивується, як тільки він потрапляє з організму в зовнішнє середовище. Клінічні прояви патологічного процесу залежать від стадійності інфекції.

Початкова стадія інфекції (гостра фаза)

Перший прояв інфекції спостерігається через 2-3 тижні після зараження.

У цей період симптоми ВІЛ такі: гарячка, біль у горлі, м’язовий біль, висип, лімфаденопатія, головний біль, втома і т. д. З’являються симптоми грипу або ангіни (як правило, моноцитарного типу).

Ранні ознаки хвороби можуть супроводжувати пацієнта від декількох днів до місяця і більше, у багатьох випадках спонтанно зникають. Діагностувати захворювання в цей період вважається максимально вигідним для хворого. Лікування антиретровірусними препаратами на початковому етапі інфекції показує найбільш позитивні результати.

Важливо! Пацієнтам, які мають будь-які інфекції, що передаються статевим шляхом (сифіліс, гонорея, ВПЛ, хламідії тощо) в обов’язковому порядку рекомендується здача аналізу на ВІЛ. У хворих ретровірусом досить часто виявляють паралельне протягом ЗПСШ.

Безсимптомна фаза

Кількість вірусу в крові, яка досягла піку через імунної відповіді (індукція таких списків або продукування антитіл) після зараження, знижується до певного рівня, через 6-8 місяців, і набуває фазу безсимптомного перебігу. Подібна фаза може тривати кілька років.

Читайте також:  Що є першими ознаками ВІЛ? Найбільш явні симптоми

Після чого змінюється періодами загострення: симптоми грипу, нездужання, збільшення лімфатичних вузлів. У цей період пацієнт як ніколи вразливий перед іншими інфекційними патологіями: ЗПСШ, гепатит, герпес, туберкульоз.

Стадія початку Сніду

Без анти-ВІЛ-терапії після зараження, інфекція прогресує, а CD4-позитивних Т-клітини стрімко знижуються. Коли число лімфоцитів CD4 становить 200 / 3 мм або менше, опортуністичні інфекційні захворювання, такі як пневмонія, туберкульоз, розвиваються з імовірністю в 90%.

Крім того, якщо кількість лімфоцитів CD4 нижче 50 / мм 3 — високий шанс розвитку цитомегаловірусної інфекції, атипового мікобактеріозу (93% випадків), первинних лімфом ЦНС, злоякісних утворень. У хворих відзначається різке зниження апетиту, втрата маси тіла аж до анорексії, постійні порушення дефекації з переважанням діареї, слабкість тощо.

Етіологія, патогенез, епідеміологія: ВІЛ — вірус із сімейства РНК-вмісних патогенів, вражає клітини імунної системи, провокує розвиток Сніду, опортуністичних інфекцій, онкологію. Згідно зі статистичними даними, наведеними на 2011 рік, у світі зареєстровано 62 мільйони пацієнтів з діагнозом ВІЛ.

Поки пацієнт вдається до антиретровірусної терапії, можна знизити вірусне навантаження в значній мірі. Але, на жаль, повністю ліквідувати вірус з організму неможливо. Тому вкрай важливо якнайшвидше діагностувати захворювання і розпочати відповідне лікування.

Методи діагностики ВІЛ

Діагностичні заходи по виявленню ВІЛ-інфекції включають два етапи:

  • виявлення факту зараження (наявність в організмі ретровірусу)
  • визначення стадії процесу (як давно відбулося інфікування і як сильно уражені клітини імунної системи)

Результати діагностики дозволять визначитися з тактикою терапії і спрогнозувати подальший перебіг хвороби.

Існують різні серологічні методики виявлення інфекційних, вірусних і бактеріальних патологій. При діагностуванні ВІЛ, як правило, застосовуються наступні серологічні аналізи.

ІФА (імуноферментний аналіз)

Є найбільш часто призначуваних аналізом при необхідності підтвердити/спростувати наявність в організмі ретровірусу.

Аналіз заснований на визначення антитіл до вірусу, які утворюються в ході потрапляння патогена в організм людини. Інформативність діагностичного методу досягає 96%.

Однак, якщо дослідження проводиться ще на етапі відсутності антитіл, можна отримати хибнопозитивний результат. В такому разі призначається повторне дослідження ІФА через 2-3 місяці. Але набагато доцільніше проведення ПЛР-аналізу, здатного виявити зараження на самих ранніх термінах.

Також отримати хибнопозитивний результат можна при наявності у пацієнта:

  • патологій аутоімунного характеру
  • інфекцій, що протікають в хронічній формі
  • захворювань онкологічного типу

В іншому випадку, даний результат може бути отриманий при наявності ранніх термінів вагітності.

Імунний блотинг (Western Blot)

Специфіка аналізу спрямована на виявлення білків ВІЛ-інфекції.

Як правило, діагностика проводиться в якості підтверджуючого тесту. При позитивному результаті дає можливість поставити остаточний діагноз «вірус імунодефіциту людини».

Стандартно імуноблотинг видає три варіанти результату: позитивно, негативно, сумнівно. У перших двох випадках розшифровка проста — ВІЛ відсутня/наявна.

Сумнівний варіант, як правило, означає наявність в організмі ВІЛ. Але з інфікуванням не більше трьох місяців тому, коли організм не встиг виробити весь спектр антитіл.

Читайте також:  Експрес тест на ВІЛ в аптеках: ціна, в домашніх умовах і відгуки

Також, отримання сумнівного результату властиво для пацієнтів з туберкульозом, злоякісними патологіями, які пройшли багатократні маніпуляції з переливання крові.

ПЛР (полімеразна реакція)

Суть методу полягає у визначенні ДНК вірусу і його РНК. Є найбільш інформативним і достовірним методом виявлення патогенів.

Може виявити ВІЛ на ранніх термінах інфікування, ще до утворення антитіл до ретровирусу. Чутливість ПЛР становить 99%, отримати помилковий результат практично неможливо.

Полімеразна реакція призначається пацієнту з метою:

  • вказати присутність або відсутність вірусу ВІЛ в організмі людини при сумнівних результатах, отриманих в ході інших лабораторних тестів
  • ідентифікації ретровірусу типу (ВІЛ-1, ВІЛ-2), а також для встановлення навантаження на організм, спровокованої вірусом
  • встановлення статусу народженої дитини від матері, яка має захворювання
  • виявлення патогена у крові, яка в подальшому буде використана для переливання

ПЛР є найбільш точним аналізом, здатним виявити ретровірус через 7-10 днів після попадання в організм. При цьому точність результату на даному терміні буде становити 98-99%.

Однак, ПЛР має деякі особливості, з цієї причини може призначатися кілька разів. У зв’язку з високою чутливістю аналіз здатний реагувати не тільки на ретровірус. Але і на самі незначні інфекційні процеси, що відбуваються в організмі. Тому остаточний діагноз після одноразового проведення полімеразної реакції не ставиться.

Наступна особливість ПЛР — необхідність сучасної і дорогої апаратури. Тому аналіз не проводиться в державних клініках. Здійснюється тестування в сучасних лабораторіях, де вартість аналізу може стартувати від 400 грн.

Експрес-тестування

Призначається в екстрених ситуаціях, коли терміново потрібно проведення оперативного втручання.

Біологічним матеріалом для дослідження є сеча. Експрес-тест, на думку деяких фахівців, має точність до 96%, але, тим не менш, є додатковим тестуванням. На підставі одержаних результатів даного дослідження, діагноз не ставиться.

В обов’язковому випадку проводиться ІФА або ПЛР.

Терміни і ціна діагностики ВІЛ

Через який час можна отримати готовий аналіз?

Відповідь лабораторного центру про результати аналізу можна отримати через декілька днів, в залежності від завантаженості установи.

Також у багатьох центру є додаткового послуга «термінове тестування», що дозволяє отримати результат через кілька годин.

Щодо цінової політики, то вартість буде залежати від обраної лабораторії і методики дослідження. Так, вартість може стартувати від 250 грн і досягати 4 000-6 000.

Ціна Western Blot стартує від 1000 грн і може досягати 1500-2000. Отримати готовий результат можна через 2-5 днів.

Якщо проводиться ПЛР у реальному часі з визначенням обох типів ретровірусу, а також їх РНК і ДНК, вартість може досягати 2000 грн і вище. Тривалість діагностування від 5 до 10 днів.

Згідно з чинним законом, імунологічні дослідження, що проводяться в державних установах, надаються на безоплатній основі. Аналіз на ВІЛ в обов’язковому порядку призначається пацієнткам у період вагітності, хворих у передопераційний період, донорам органів або частини тканини.

Вікторія Стоянова
Вікторія Стоянова

Лікар-лаборант, спеціалізація - клінічна лабораторна діагностика.

Molo4nica.in.ua
Додати коментар